目的：规范HCV检测的操作范围：检验科免疫实验室责任人：免疫实验室专业组长和实验室工作人员应用仪器：酶标仪检测原理：本试剂盒采用丙型肝炎病*（HCV）重组嵌合抗原作为包被抗原，采用ELISA法检测丙肝病*抗体（抗—HCV）。样品加入已有样品稀释液的包被抗原反应孔，在随后的温育过程中，若样品中含特异性抗体（抗—HCV），则该抗体与包被抗原形成抗原—抗体复合物被吸附到固相上，再加入酶标记的第二抗体，最终形成抗原—抗体—酶标二抗复合物，洗涤除去未结合的游离酶，加入显色剂后显色。试剂：抗—HCVELISA的试剂盒标本收集：1、最好使用新鲜血清样本，如需保存，可置2-8℃冷藏48小时或-20℃冷冻4周。2、避免使用溶血、浑浊或脂血样本及反复冻融样本。试剂规格：每盒96人份试剂盒组成：1、包被反应板1包2、样品稀释液1瓶3、阴性对照1瓶4、阳性对照1瓶5、洗涤液（20倍）1瓶6、酶标二抗1瓶7、显色剂A1瓶8、显色剂B1瓶9、终止液1瓶10、说明书1份11、密封袋1个12、封板膜3张操作程序：1、配洗液：取适量蒸馏水稀释20倍洗涤液（将50ml20倍洗涤液加水稀释至ml），充分摇匀后备用。2、加样品稀释液：用加样器在微孔反应条板孔中加入样品稀释液，每孔ul，孔下四孔准备加对照。3、加标本和留空白：将每份待检标本各10ul分别加入已有样品稀释液的各孔中，留下一孔不加标本作空白对照，标好位置。4、加对照：在预先空下的4孔中用加样器分别加入阴性对照一孔，阳性对照三孔，每孔ul，标好位置。阴、阳对照应在所有待检标本加完后再加，以保证阈值计算准确性。5、温育（一）：充分混匀，加上封板膜，37oC温育30分钟。6、洗涤：洗板机洗板7、加酶标二抗：各孔中加入酶标二抗ul，加上封板膜。8、温育（二）：37oC温育30分钟。9、洗板（二）：方法同洗板（一）。10、加显色剂：每孔加入显色剂A50ul，全部加完后再在每孔中加入显色剂B50ul，混匀，加上封板膜。11、温育（三）：37oC显色20分钟。（显色20分钟指从开始加显色剂B到开始加终止液的间隔时间）11、终止：显色完毕后立即于每孔加50ul终止液，混匀。12、测定：酶标仪检测：开机--电击桌面--Auslab酶标实验室--实验--实验名称--HBsAg--读新板--输入板号--点开始--点实验项目（HBsAg）--确定--放置检测板（应先输入阴阳空白对照孔及室内质控孔位置）--点自动编码--确定（仪器检测）--保存--打印结果。注意事项：1、试剂的使用：整个检测工作中应严格防止交叉感染，操作时必须带手套，穿工作衣，严格健全和执行消*隔离制度。所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按传染物处理。2、试剂的准备和保存：①试剂盒保存于2-8oC，使用前整套试剂应恢复至室温。②试剂开封后如未用完，板条应和干燥剂一起放入密封袋内密封保存，其他液体组份瓶盖应拧紧。由于采用了特殊稳定技术，试剂开封后一个月内不影响使用。3、试剂的组份：本试剂盒中的样品稀释液采用变色技术，在加原始血清或血浆标本后由*绿色变为兰紫色。非原始血清或血浆（如稀释标本等）颜色变化不明显或变为其他颜色为正常现象。4、加样：①样品稀释液、待测标本、阴性对照和阳性对照均须加液器加注，并经常核对其准确性。②阴、阳对照无须稀释，直接用加样器加ul于各孔中。③阴、阳对照应在所有待检标本加完后再加，以保证阈值计算的准确性。④先统一加显色剂A，后统一加显色剂B，两者顺序不要颠倒，显色计时从加入第一孔显色剂B开始。⑤有条件的用户请用加样器加所有成分；在作精密性测定时尤应如此。5、洗涤：①洗涤时各孔均需加满洗液，防止孔内有游离酶未洗净。②洗板应注意洗净，手工洗时每次洗一次均要拍干，洗板机洗时应注意减少残留，洗完后在毛巾或吸水纸上拍干。6、温育：①注意控制反应时间，温育30分钟应控制在30±1分钟内，温育20分钟应控制在20±1分钟内，避免因反应时间延长造成整体显色升高。②封膜板不能重复使用。7、判读：①测定结果的判定必须以酶标仪读数为准。肉眼观测显色但OD值低于阈值的标本应判为阴性。②检测时必须设置空白对照，并在结果分析时注意扣除空白值。8、其他：①产品批号、失效日期见瓶体标签及包装盒。②试剂过期不要用，不同批号的试剂盒中的组份不能混用，试剂瓶盖切勿交叉使用参考范围：样品OD值S/C.O.≥1为阳性；样品OD值S/C.O.1为阴性临床意义：抗-HCV是非中和抗体，是HCV感染的标志，抗-HCV的存在一般表示有传染性。高效价的抗-HCV，常与HCV现存感染有关，如能同时查到HCV-RNA即可确诊病*复制和有传染性。在疾病的急性期，抗体通常在丙肝起病和接触病*后3-6月后升高。抗体升高可和转氨酶峰值一致或在其后。抗-HCV一般在感染发展成慢性的病人中持续下去。在缓解的病例，抗体在6-12月内消失，然而，抗-HCV也可能在长达四年的时间内被检测到。抗-HCV检测可用于丙肝病原学诊断、流行病学调查，筛选献血员和血液制品等。
●检验图谱
粪便中常见医学蠕虫卵的形态
●检验图谱
疟原虫形态
●检验图谱
尿液管型和结晶
●检验图谱
四种疟原虫姬氏染色各期形态
●细说血脂，再看不懂您就下岗吧！
●质量失控常见原因汇总，必须收藏！
●检验医师应该掌握的临床疾病实验室检查及结果分析有用，就点一个“在看”吧戳原文，检验医学推荐用书！预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇